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Il test di neutralizzazione del virus (VNT Virus neutralization test) è ampiamente utilizzato per lo studio sierologico della peste suina classica (PSC) e per la valutazione dell'efficacia dei vaccini contro la PSC. Tuttavia, VNT è una procedura lenta che richiede coltura cellulare e manipolazione di virus vivi. Il vaccino contro il ceppo C della PSC è il più ampiamente usato per il controllo e la prevenzione della PSC. In questo studio, presentiamo un test di immunosorbimento enzimatico competitivo (cELISA) basato su anticorpi monoclonali neutralizzanti (mAb) con un'enfasi sulla sostituzione VNT per il monitoraggio post-vaccinale del ceppo C.
È stato generato un anticorpo monoclonale (6B211) con potente attività neutralizzante contro il ceppo C. È stato stabilito e ottimizzato un nuovo cELISA basato sulla strategia secondo cui 6B211 può competere con gli anticorpi neutralizzanti indotti dal ceppo C nel siero di suino per legarsi all'E2 e catturare l'antigene del ceppo C. Durante il test di sieri di suino VNT negativi per il ceppo C (n = 445) e sieri di suino positivi VNT con ceppo C (n = 70), il cELISA basato su 6B211 ha mostrato sensibilità al 100% (intervallo di confidenza al 95%: dal 94,87 al 100%) e specificità al 100% (intervallo di confidenza al 95%: dal 100 al 100%).
Gli anticorpi anti-ceppo C nei suini possono essere analizzati con il cELISA a partire da 7 giorni dopo la vaccinazione. Nel testare i sieri di suino (n = 139) in parallelo, il cELISA ha mostrato un'eccellente concordanza (Kappa = 0,957) con VNT. Il tasso di inibizione dei campioni di siero nel cELISA è fortemente correlato con i loro titoli VNT (r2 = 0.903). Inoltre, i test intra e inter-test del cELISA hanno mostrato una ripetibilità accettabile con un basso coefficiente di variazione (CV).
Questo nuovo cELISA ha dimostrato un'eccellente concordanza e un alto livello di correlazione con VNT. È uno strumento sicuro per il monitoraggio sierologico della campagna di vaccinazione contro il ceppo C in quanto è un test rapido, semplice, sicuro ed economico che può essere utilizzato per controllare la risposta immunitaria indotta dal vaccino a livello di popolazione.
Wang, L., Mi, S., Madera, R. et al. A neutralizing monoclonal antibody-based competitive ELISA for classical swine fever C-strain post–vaccination monitoring. BMC Vet Res 16, 14 (2020). https://doi.org/10.1186/s12917-020-2237-6
