Il presente studio mirava a indagare se il dolore acuto associato alla castrazione e al taglio della coda dei suinetti maschi possa modulare l'espressione dei microRNA salivari (miRNA) e per esplorare il loro potenziale utilizzo come biomarcatori. Trentasei suinetti sani di 4 giorni di età (Hermitage × Duroc) sono stati assegnati in modo casuale a tre gruppi: il primo gruppo (12 suinetti) è stato pretrattato con farmaci anestetici e antinfiammatori (ANA) e poi castrato e tagliata la coda; il secondo (12 suinetti) è stato castrato e la coda tagliata senza farmaci (CONV); il terzo (12 suinetti) è stato solo manipolato (SHAM).
La saliva è stata raccolta 10 minuti prima (gruppo di controllo) e a 30 a 45 minuti dopo le procedure. Il cortisolo salivare è stato quantificato. Le concentrazioni di espressione di sette miRNA, vale a dire miR-19b, miR-27b-3p, miR-215, miR-22-3p, miR-155-5p, hsa-miR-365-5p e hsa-miR-204, erano misurati e valutati come potenziali biomarcatori del dolore mediante reazione a catena della polimerasi quantitativa utilizzando sonde TaqMan. L'area sotto la curva operativa del ricevitore (AUC) è stata utilizzata per valutare le prestazioni diagnostiche dei miRNA. La concentrazione di cortisolo salivare è aumentata dopo il trattamento in CONV e ANA, mentre non è stata osservata alcuna variazione significativa nel gruppo SHAM.
L'analisi comparativa ha dimostrato che le concentrazioni di miR-19b salivare (P = 0,001), miR-27b (P = 0,042) e miR-365 (P <0,0001) erano significativamente maggiori in CONV rispetto al pretrattamento. L'AUC del pretrattamento vs CONV e CONV vs ANA erano eccellenti per miR-19b e miR-365 e discrete per miR-27b. La combinazione di due miRNA, vale a dire miR-19b e miR-365, in un pannello ha aumentato l'efficienza della distinzione tra gruppi pre e post-trattamento. Non sono state identificate differenze tra i gruppi SHAM e ANA. Sono stati studiati potenziali bersagli di mRNA di miRNA espressi in modo differenziale e sono stati identificati geni correlati al dolore e all'infiammazione: miR-19b modula potenzialmente TGF-beta e le vie di adesione focale, miR-365 regola l'espressione delle citochine (cioè IL-1, Tumor Necross Factor -alfa e citochina IL-8) e miR-27b regolano i percorsi delle proteine infiammatorie dei macrofagi (cioè MIP1-beta).
In conclusione, abbiamo dimostrato che l'abbondanza di miR-19b, miR-27b e miR-365 aumenta nella saliva dei suinetti castrati e con la coda tagliata senza la somministrazione di farmaci antidolorifici. Sono necessari ulteriori studi per valutare il loro potenziale durante le procedure di allevamento di routine e per estendere la loro valutazione in altri eventi stressanti, come lo svezzamento o il dolore cronico...
Salivary microRNAs are potential biomarkers for the accurate and precise identification of inflammatory response after tail docking and castration in piglets Cristina Lecchi, Valentina Zamarian, Chiara Gini, Chiara Avanzini, Alessia Polloni, Sara Rota Nodari, Fabrizio Ceciliani Journal of Animal Science, Volume 98, Issue 5, May 2020, skaa153, https://doi.org/10.1093/jas/skaa153