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I tremori congeniti (TC; mioclonie congenite) sono una malattia sopradica, però diffusa a livello mondiale che colpisce i suinetti appena nati e che si caratterizza per le mioclonie. Anche se la malattia si conosce da oltre 100 anni, i casi più recenti di TC sono attribuiti clinicamente ad un virus non identificato.
Gli obiettivi di questo progetto furono due: 1) Identificare il patogeno (i) potenziale mediante la sequenziazione della nuova generazione nei casi rinvenuti e 2) sviluppare un modello innovativo di inoculazione per riprodurre i TC.
La sequenziazione della nuova generazione venne realizzata su tessuti a partire da 2 casi di campo di TC. Si rilevò un nuovo agente. Per il secondo obiettivo, 7 scrofe di incrocio identificate individualmente furono assegnate a caso ad uno dei 3 gruppi : 1) falsa inoculazione a 45 (n=1) e 62gg di gestazione (n=1), 2) inoculazione con pestivirus a 45gg di gestazione (n=2) e 3) inoculazione con pestivirus a 62gg di gestazione (n=3). Le scrofe furono anestetizzate e venne estratto l'utero. Si usò un apparecchio ad ultrasuoni per visualizzare ogni feto ed iniettare ad ogni vescicola fetale 0,25 ml di PBS (placebo) o siero con pestivirus. Anche le scrofe furono inoculate simultaneamente per via intravenosa ed intranasale. Le scrofe partorirono normalmente. I suinetti furono registrati in video a 0, 24 e 48 h post-parto per determinare e punteggiare l'intensità dei tremori. I suinetti furono sacrificati a 48h post-parto.
A partire da questi 2 casi di campo venne identificato un nuovo tipo di pestivirus che in precedenza era stato correlato strettamente con un pestivirus di pipistrelli cinesi e che ora si correla più strettamente con un nuovo pestivirus suino. La PCR permise di rilevare l'RNA del pestivirus in molteplici tessuti dei suinetti colpiti da TC, però non nei suinetti non colpiti. I suinetti neonati dei gruppi di scrofe inoculate con pestivirus a 45 e 62gg di gestazione vennero colpiti da TC con una prevalenza nelle figliate colpite che andava dal 57 fino al 100%. L'intensità dei tremori congeniti variò da lieve a grave. L'RNA del pestivirus venne rilevato con la PCR in numerosi tessuti alla necroscopia, incluso il siero, sangue completo, cervello, cervelletto, tronco encefalico, midollo spinale, gangli linfatici mesenterici e gangli linfatici tracheobronchiali. Nei suinetti controllo non si si osservarono tremori congeniti e nemmeno si rilevò RNA mediante PCR.
Si tratta del primo studio che identifica un nuovo pestivirus suino associato ai tremori congeniti e che riproduce con successo la malattia dopo l'inoculazione dei feti nell'utero.
Development of congenital tremors following novel Pestivirus inoculation. L. Arruda, Paulo Arruda, Drew R. Magstadt, Kent J. Schwartz, Tyler Dohlman, Jennifer A. Schleining, Abby Patterson, and Joseph Victoria. IPVS, 2016.
