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Sviluppo ed ottimizzazione di tecniche di campionamento per campioni ambientali da superfici contaminate dal virus della peste suina africana senza contaminanti organici

I ricercatori dell'Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell'Umbria e delle Marche hanno studiato le miglior tecniche di prelievo dei campioni su varie superfici...

Figura 1. Rilevamento del DNA del virus della peste suina africana (ASFV) in campioni ambientali. Le superfici in acciaio inossidabile sono state inoculate con 100 μL di sangue infetto da ASFV e tamponate utilizzando diversi tipi di dispositivi di campionamento. Il surnatante è stato sottoposto a PCR quantitativa per rilevare il DNA dell'ASFV. Sono stati utilizzati 100 microlitri di sangue per il controllo positivo. La quantità di DNA dell'ASFV (numero di copie per mL) è stata trasformata in logaritmo per l'analisi statistica e la tendenza centrale è stata rappresentata dalla media dei valori trasformati in logaritmo. Le differenze statistiche tra ciascun dispositivo asciutto e bagnato sono state valutate tramite il test t di Student (valore p
Figura 1. Rilevamento del DNA del virus della peste suina africana (ASFV) in campioni ambientali. Le superfici in acciaio inossidabile sono state inoculate con 100 μL di sangue infetto da ASFV e tamponate utilizzando diversi tipi di dispositivi di campionamento. Il surnatante è stato sottoposto a PCR quantitativa per rilevare il DNA dell'ASFV. Sono stati utilizzati 100 microlitri di sangue per il controllo positivo. La quantità di DNA dell'ASFV (numero di copie per mL) è stata trasformata in logaritmo per l'analisi statistica e la tendenza centrale è stata rappresentata dalla media dei valori trasformati in logaritmo. Le differenze statistiche tra ciascun dispositivo asciutto e bagnato sono state valutate tramite il test t di Student (valore p <0,05: * e <0,0001: ****).
9 Agosto 2024
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La peste suina africana (PSA) è una malattia altamente contagiosa che colpisce i suini domestici e i cinghiali selvatici, con una mortalità fino al 100%. Il virus della PSA (ASFV) è un agente causale responsabile della PSA e altamente resistente negli ambienti, il che crea una sfida significativa per il controllo e l'eradicazione del virus. Nonostante l'espansione geografica della PSA e il movimento internazionale di prodotti per sostenere il sistema di produzione suina, vi sono conoscenze limitate sull'uso di campioni ambientali per eseguire la sorveglianza per prevenire l'introduzione della PSA nelle aree indenni da PSA e per il controllo della trasmissione nelle aree colpite. Pertanto, questo studio mirava a sviluppare e ottimizzare le tecniche di campionamento per campioni ambientali per il rilevamento della PSA.

Materiali e Metodi: Le superfici in acciaio inossidabile sono state contaminate con sangue infetto da PSA, tamponate utilizzando diversi dispositivi e quindi elaborate tramite tecniche diverse. I campioni ambientali sono stati elaborati e testati utilizzando l'analisi qPCR.

Risultati: I risultati hanno mostrato che l'uso di spugne chirurgiche di garza pre-inumidite, tamponi di pulizia e bastoncini di spugna ha determinato una maggiore sensibilità, rispetto ai dispositivi di campionamento a secco o al tampone Dacron. In particolare, la combinazione del bastoncino di spugna e del conservante commerciale per acidi nucleici ha supportato il miglior rilevamento del DNA dell'ASFV (PSAV) sulle superfici pulite in acciaio inossidabile valutate. La pre-incubazione per un breve periodo di tempo e la centrifugazione a bassa velocità sono state sufficienti per fornire una sensibilità diagnostica soddisfacente del rilevamento dell'ASFV utilizzando la qPCR per campioni ambientali. I nostri risultati contribuiscono allo sviluppo di tecniche per campioni ambientali per la sorveglianza dell'ASFV per prevenire l'introduzione e la diffusione dell'ASFV....

Kwon Taeyong , Gebhardt Jordan T. , Lyoo Eu Lim , Gaudreault Natasha N. , Trujillo Jessie D. , Woodworth Jason C. , Paulk Chad B. , Jones Cassandra K. , Richt Juergen A. Development and optimization of sampling techniques for environmental samples from African swine fever virus-contaminated surfaces with no organic contaminants Frontiers in Veterinary Science:11-2024 URL=https://www.frontiersin.org/journals/veterinary-science/articles/10.3389/fvets.2024.1425928 DOI=10.3389/fvets.2024.1425928

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