Caso Clinico: Controllo degli Streptococchi in una scrofaia: una Esperienza di Campo

Introduzione

Attualmente gli streptococchi insieme alla diarrea colibacillare sono le 2 patologie più ricorrenti sia nella fase di lattazione che nella fase di svezzamento, oltre ad essere responsabili di perdite significative nel settore suinicolo. In questo nuovo scenario produttivo, la profilassi vaccinale e l’igiene risultano essere alcune delle migliori misure adottabili per controllare entrambi i processi patologici.

Caso clinico

In questo Caso Clinico cercheremo di spiegare l'approccio per il controllo degli streptococchi in uno scenario attuale, in cui la riduzione degli antibiotici è sempre più presente.

Si tratta di una scrofaia commerciale in fase 1 (produzione di suinetti da 6 kg) con un censimento di 2.000 scrofe in un'area ad alta densità di suini nel sud-est della Spagna. Inizialmente l'allevamento riceveva la rimonta da diverse fonti, ma negli ultimi anni l'ingresso delle scrofette è rimasto dalla stessa origine, l'allevamento di moltiplicazione propria dell'azienda.

Nella fase I di questa origine, la comparsa di sintomi clinici di streptococchi nei suinetti era comune. Le principali manifestazioni cliniche sono state l'artrite durante tutta la lattazione, sia agli arti anteriori che posteriori, e la meningite, soprattutto alla fine del periodo di lattazione (dai 23 giorni in poi). La percentuale di morti e di animali che non si sono ripresi variava dall'1,5 al 2% in sala parto.

Video: 1. Artriti in suinetti nella gabbia parto.

Nella fase di svezzamento, era frequente riscontrare casi singoli o episodi multipli, era comune anche trovare meningiti, artriti e/o polmoniti, potendo esprimersi anche come shock settico, colpendo, in questo caso, animali con condizioni corporee migliori.

Video 2. Setticemia streptococcica in sala parto.

Approccio e controllo

Il cambiamento dello scenario attuale basato sulla limitazione e categorizzazione degli antibiotici e la mancanza di disponibilità di strumenti per il controllo degli streptococchi ha fatto sì che si debbano cercare altre alternative per il loro controllo.

Dato il problema posto dagli streptococchi in questo allevamento, il controllo è stato attuato concentrandosi su diversi mezzi: gestione delle strutture e uso di vaccini stabulogeni. È anche essenziale ridurre lo stress dei suinetti nella fase di svezzamento e, per fare ciò, aumentiamo lo spazio per suinetto e miglioriamo le condizioni minime di temperatura e ventilazione, poiché i capannoni poco ventilati aumentano il rischio di soffrire di streptococchi. L’uso dei vaccini stabulogeni rappresenta un’alternativa utile per affrontare questa patologia, anche se con alcune limitazioni.

Video 3. Inizio di meningiti in suinetti.

Il problema fondamentale con lo Streptococcus suis è che esistono circa 35 sierotipi diversi e non esiste alcuna prova scientifica di immunità crociata tra di loro. Diversi possono coesistere nello stesso allevamento, sebbene esista una chiara relazione epidemiologica tra i sierotipi e l'origine della rimonta dell'allevamento. Abbiamo riscontrato che in molti allevamenti possono coesistere diversi sierotipi, sia patogeni che non patogeni. Questo fatto rende difficile conoscere il sierotipo responsabile della malattia e, quindi, scegliere il sierotipo appropriato per la produzione del vaccino stabulogeno.

Realizzare un vaccino stabulogeno, primo tentativo…

Una volta capito che uno dei modi per controllare gli streptococchi era l’uso dei vaccini stabulogeni, abbiamo pensato a loro...

Si cominciò ad inviare campioni al laboratorio per l'isolamento dello Streptococcus suis e, qui, sorse uno dei problemi, poiché molti di questi campioni risultarono negativi, anche se era evidente che l'animale presentava sintomi compatibili con lo streptococco. Questa esperienza ci ha ricordato che è di vitale importanza saper campionare adeguatamente, scegliendo gli animali appropriati clinicamente colpiti, per ottenere una rappresentazione dei sierotipi responsabili della patologia in allevamento. È inoltre fondamentale scegliere animali che non siano stati precedentemente trattati con antibiotici. Il prelievo di campioni da animali nel bel mezzo di un’epidemia è solitamente una garanzia di successo e il campionamento dovrebbe essere il più ampio possibile, coprendo sia i casi che si verificano nella fase di sala parto che nella fase di svezzamento. I principali campioni di scelta sono le articolazioni o le teste e il sangue con anticoagulante.

Siamo così riusciti a isolare diversi sierotipi di Streptococcus suis e a determinare quale di essi fosse patogeno: in questo primo tentativo abbiamo determinato i fattori di virulenza. E' importante sapere quali sierotipi sono patogeni in quanto, nel caso di questo allevamento, avendo avuto inizialmente l'ingresso di scrofette di varia origine, il numero di sierotipi di streptococco presenti in allevamento è molto elevato.

Per tipizzare il ceppo, i principali fattori di virulenza determinati sono stati:

• Gen mrp. Codifica la proteina di rilascio della muraminidasi, ma non è chiaramente correlata alla virulenza del ceppo in questione.
• Gen epf. Codifica il fattore extracellulare, anche se l'assenza della proteina che codifica non determina se il ceppo in questione sia virulento o meno.
• Gen sly. Codifica la suilisina, un'emolisina con caratteristiche citotossiche.

Una volta scelti i sierotipi che determiniamo come patogeni, realizziamo il vaccino stabulogeno utilizzando l'idrossido di alluminio come adiuvante. Questo adiuvante è stato utilizzato poiché era l'unico di cui disponeva il laboratorio.

Vacciniamo tutti i riproduttori dell'allevamento e li rivacciniamo ogni mese. Si è deciso di effettuare la vaccinazione a tappeto con l'obiettivo di ridurre la pressione del contagio nella popolazione.

Tuttavia, i risultati non sono stati quelli attesi poiché le manifestazioni cliniche non sono state ridotte né nella fase I né nella fase II.

Video 4. Streptococcosi nelle gabbie parto.

Realizzare un vaccino stabulogeno, secondo tentativo…

Convinti che i vaccini stabulogeni debbano avere un effetto positivo sul controllo degli streptococchi, visto che li utilizziamo per altre patologie e sono di grande aiuto, abbiamo deciso di riprovarci, chiarendo in alcune parti il ​​processo per ottenerli.
È iniziato l'invio dei campioni per l'isolamento dei patogeni con lo stesso approccio del caso precedente.

Una volta isolato lo Streptococcus suis, oltre a determinare i fattori di virulenza, abbiamo determinato la sequenza tipo di ogni sierotipo.

È importante determinare i fattori di virulenza, ma non sono gli unici da chiarire, poiché esistono ceppi che non contengono alcuni dei fattori di virulenza e sono estremamente patogeni.

Tabella 1. Ceppi di Streptococcus suis isolati sia in sala parto che in svezzamento per la preparazione del vaccino stabulogeno (Fonte: Elaborazione propria)

Sono stati determinati gli antigeni polisaccaridici della capsula, dopo aver tipizzato alcuni fattori di virulenza per determinare se il ceppo è patogeno o meno. Questa determinazione viene effettuata con tecnologia molecolare eseguendo qPCR sui diversi geni che codificano i principali fattori di virulenza.

L'identificazione molecolare del ceppo mediante tipizzazione sequenziale multilocus (ST: sequence type), ci permette di tipizzare il batterio e quindi di confrontarlo con ceppi identificati come patogeni, nei casi in cui identifichiamo più ceppi nel nostro campionamento. Questa tecnica di laboratorio è altamente standardizzata e può fornire informazioni molto precise sulla patogenicità dei ceppi precedentemente isolati.

Come abbiamo accennato in precedenza, dobbiamo valutare sia i fattori di virulenza che la sequenza tipo di ciascuno dei nostri ceppi e scegliere quelli che hanno il maggiore carattere patogeno.

Dopo aver scelto i ceppi, è importante non superare il numero di ceppi da includere nel vaccino stabulogeno per evitare la loro instabilità.

Oltre a scegliere i ceppi di maggiore interesse patogeno, è fondamentale la scelta dell'adiuvante, poiché è essenziale generare un'adeguata risposta immunitaria nell'animale. Diversi studi dimostrano che l’uso dell’idrossido di alluminio come adiuvante non è una buona opzione dato che nell’animale non è evidente alcun tipo di risposta umorale e gli adiuvanti oleosi sono più immunogenici (M. Gottschalk et al., 2022).

Una volta ottenuto il vaccino stabulogeno con questo nuovo protocollo di selezione dei ceppi e del nuovo adiuvante, abbiamo nuovamente vaccinato i riproduttori dell'allevamento con vaccino e rivaccinato dopo 3-4 settimane. Oltre alla vaccinazione delle scrofe produttive, è stato stabilito un protocollo di vaccinazione per le scrofette durante il periodo di acclimatazione all'allevamento, applicando 2-3 dosi durante la fase di accrescimento.

Con questo 2° tentativo siamo riusciti a ridurre, praticamente totalmente, le manifestazioni cliniche dello streptococco in lattazione. La loro comparsa è leggermente ritardata anche in svezzamento, nella quale, nonostante compaiano dei casi, il numero delle terapie antibiotiche contro gli streptococchi si riduce e siamo in grado di controllare i sintomi in modo più efficace.

Attualmente l'allevamento prosegue con il vaccino stabulogeno, vaccinando tutti i riproduttori a tappeto secondo la clinica dell'allevamento e proseguendo con la vaccinazione delle scrofette 3 volte durante il loro acclimatamento sanitario. È importante controllare i casi che si presentano per garantire che i sierotipi non varino.

Conclusioni

Affinché un vaccino stabulogeno funzioni:

• Il campionamento dovrebbe essere il più ampio possibile per avere nell'allevamento il maggior numero possibile di ceppi responsabili della malattia.
• Stabilire uno screening preventivo mediante la sierotipizzazione e il rilevamento dei fattori di virulenza.
• Eseguire sequenze tipologiche nei casi in cui siano presenti più ceppi, con l'obiettivo di differenziare i ceppi patogeni dai ceppi opportunistici nell'allevamento.
• Esiste una relazione epidemiologica molto importante tra l'allevamento di moltiplicazione di origine delle scrofette e l'allevamento di produzione.
• Essere chiari sull’adiuvante utilizzato nel vaccino per garantire la risposta immunitaria appropriata.
• Stabilire il protocollo vaccinale appropriato in allevamento in cui le scrofette devono essere un attore fondamentale poiché di solito sono quelle che trasmettono maggiormente l'infezione alla loro prole.