Diagnosi di Laboratorio: Dissenteria Suina (Brachyspira hyodysenteriae)

Test disponibili:

Coltura batterica

• Isolamento di organismi vivi.
• Tipo di campione: feci.
• Pro:
  • Relativamente a buon mercato.
  • La presenza di Brachyspira spp. fortemente beta-emolitica è associata alla virulenza.

Tabella 1: Relazione tra la beta-emolisi in Brachyspira spp. e la malattia.

• Contro:
  • Meno sensibile del test PCR.
  • Crescita lenta (fino a 10 giorni).
  • Richiede coltura anaerobica.
  • Alcuni ceppi meno virulenti possono essere trovati negli allevamenti senza segni clinici o lesioni.

Suscettibilità antimicrobica

• Test in vitro: capacità di un organismo vivente di crescere sotto specifiche concentrazioni di diversi antimicrobici.
• Tipo di campione: feci.
• Pro:
  • Identificazione della suscettibilità o resistenza di ceppi specifici ai comuni antimicrobici.
• Contro:
  • Richiede un isolato batterico.
  • I test in vitro possono differire leggermente dai risultati in vivo.
  • Alcuni antimicrobici specifici potrebbero non essere inclusi o potrebbero richiedere test speciali separati.
  • Costo moderato.
  • I risultati richiedono 7 giorni.

Istopatologia

• Valuta la presenza di lesioni tissutali che possono confermare la presenza di malattia.
• Tipo di campione: tessuti.
• Pro:
  • Le lesioni istopatologiche possono essere altamente suggestive se si trovano molte spirochete vicino alle lesioni intestinali..
  • Può rilevare forme lievi della malattia.
  Contro:
  • I tessuti intestinali di un animale morto di recente devono essere fissati in formalina.
  • Le lesioni sono simili ad altre malattie.

Impression smear

• Rileva la presenza di batteri.
• Tipi di campioni: tessuto dell'intestino crasso, feci.
• Pro:
  • Facile da eseguire.
    • Colorazione non specifica.
    • Microscopia in campo oscuro.
  • Una diagnosi presuntiva può essere fatta rilevando un gran numero di spirochete.

    

  • È possibile identificare un numero basso, moderato o elevato di batteri presenti.
• Contro:
  • Richiede la presenza di un numero significativamente maggiore di batteri rispetto alla coltura o alla PCR.
  • Non valuta la capacità emolitica degli isolati e quindi non distingue tra ceppi non patogeni, colite da spirochete e dissenteria suina.

Polymerase chain reaction (PCR)

• Rileva la presenza di una specifica sequenza di acido nucleico batterico (DNA).
• Tipi di campioni: tessuto intestinale, tamponi fecali, feci.
• Pro:
  • Alta sensibilità.
  • La quantificazione mediante PCR è associata alla presenza di lesioni.
  • Costo moderato.
    • I campioni di feci o di tessuto possono spesso essere raggruppati per ridurre i costi e minimizzare la perdita di sensibilità (soprattutto per quanto riguarda la rilevanza clinica).
• Contro:
  • Alta sensibilità: conferma la presenza di batteri ma non della malattia.
  • Sono necessari primers adeguati per rilevare e differenziare tra Brachyspira spp.

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

• Rileva la presenza di anticorpi.
• Tipo di campione: siero.
• Pro:
  • Può rilevare l'infezione a livello di allevamento.
  • Gli anticorpi possono durare per diversi mesi.
  • I livelli sierici di IgG sono correlati alla durata dei segni clinici.
• Contro:
  • I kit non sono facilmente disponibili.
  • Bassa sensibilità e specificità.
    • Sono utilizzati per il rilevamento a livello di allevamento e non per la diagnosi dei singoli animali.
  • Gli anticorpi specifici e il tempo di rilevamento possono variare leggermente tra i diversi kit commerciali disponibili.
  • Spesso, gli antigeni utilizzati possono essere specifici per particolari specie di Brachyspira.
  • Non c'è correlazione tra i livelli di anticorpi e la protezione.
  • Non è conosciuta la protezione crociata tra Brachyspira spp.

Interpretazione dei risultati:

Coltura batterica

• Positivo: batterio presente.
  • Beta-emolisi forte – Dissenteria Suina.
  • Beta-emolisi debole – colite da spirochete o non patogena.
• Negativo: Negativo, animale eventualmente precedentemente trattato con antibiotici o troppo tardi nell'infezione.

Suscettibilità antimicrobica

• Sensibile: possibile buona scelta per il trattamento se l'antimicrobico può raggiungere il tessuto bersaglio.
• Resistente: selezionare un antimicrobico diverso.
• MIC: Se viene eseguita la MIC (concentrazione minima inibente), è necessario assicurarsi che l'antimicrobico selezionato raggiunga il valore MIC indicato nell'organo bersaglio.

Istopatologia

• Positivo: Le spirochete trovate vicino alle lesioni sono una diagnosi presuntiva.
• Negativo: nessuna lesione intestinale.

Impression smear

• Quantità di spirochete presenti:
  • Alta: altamente indicativo di malattia.
  • Moderata: interpretazione variabile.
  • Bassa: valore discutibile (potrebbe essere una condizione non patogena o cronica)
  • Non presente: animale eventualmente precedentemente trattato con antibiotici o contribuente non significativo.

PCR

• Positivo: conferma la presenza del batterio.
• Negativo: Negativo o infezione troppo vecchia per rilevare il batterio o l'animale precedentemente trattato con antibiotici.

ELISA

• Positivo: Precedenti esposizioni (>2-4 settimane) a vaccini o batteri di campo.
• Negativo:
  • Negativo al vaccino o ai batteri di campo.
  • Infezione troppo vecchia per essere rilevata.
  • L'uso di antibiotici può inibire la crescita batterica e diminuire la risposta immunitaria.

Scenari:

Suini da ingrasso con diarrea (acuta)

• Raccogliere campioni fecali da 10 o più suini con diarrea non trattati con antibiotici e inviarli per coltura batterica e PCR in pool di 5.
• Autopsia di 1-3 suini recentemente morti o soppressione di suini con diarrea. Valutare macroscopicamente l'intestino crasso (in particolare il cieco e il colon a spirale) e fissarlo in formalina per l'istopatologia.

Storia cronica di diagnosi di dissenteria suina ma senza segni clinici osservati

• Raccogli campioni di feci da 4-6 box e invia per la PCR.
• Raccogliere campioni da 15-20 suini a 14 e 18 settimane di età.
  • Due approcci alla raccolta:
    • Trasversale: raccogliere contemporaneamente da diversi gruppi di età (si ottengono risultati più velocemente).
    • Longitudinale – raccogliere dagli stessi suini nel tempo (si ottengono risultati più accurati).
  • Analisi di campioni di siero mediante ELISA.