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Applicazione pratica del monitoraggio delle lingue dei Nati Morti dopo un focolaio di PRRS

La raccolta delle lingue dei nati morti come sistema di monitoraggio della stabilità alla nascita fornisce una maggiore capacità di rilevamento del virus PRRS...

Figura 1. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive all'episodio di PRRS.
Figura 1. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive all'episodio di PRRS.

Uno degli obiettivi principali dopo un focolaio/episodio di PRRS in un allevamento di scrofe è il ritorno alla stabilità senza rilevamento della presenza del virus PRRS in tutte le fasi esistenti nell'allevamento.

La prima tappa per raggiungere il suddetto obiettivo è la stabilità alla nascita, poiché con l'assenza del virus PRRS nei suinetti appena nati si può presumere che il virus probabilmente non circoli più nelle scrofe gravide. In questo modo, l'efficacia di tutte le azioni messe in atto durante e dopo l'epidemia riproduttiva per ridurre la trasmissione e l'escrezione virale nelle scrofe gravide può essere valutata in base all'evoluzione della rilevazione del virus nei suinetti alla nascita.

Negli ultimi anni sono stati sviluppati nuovi campionamenti basati sul concetto di campioni aggregati, come nel caso degli emosieri (da testicoli ecc...) dei suinetti descritti da Vilalta el al. (2019) e Trevisan et al. (2019). Successivamente, l'uso di lingue di nati morti o carcasse in altre fasi si è posizionato come sistema di monitoraggio con buoni risultati secondo gli articoli di Baliellas e Machado et al. (2022)

Il monitoraggio alla nascita attraverso le lingue consiste nel raccogliere le lingue dei nati morti come un campione aggregato per banda di parti o per un determinato periodo di tempo. Si consiglia un massimo di 50 lingue per campione aggregato e di conservarle congelate fino all'invio al laboratorio, in modo da ottenere una quantità sufficiente di liquido sul fondo della sacca durante il processo di scongelamento per eseguire la tecnica PCR, evitando così la necessità di aggiungere un mezzo liquido nel campione che potrebbe alterare il risultato a causa di un effetto di diluizione del campione originale.

Uno dei vantaggi della raccolta di lingue di nati morti come sistema di monitoraggio per la stabilità alla nascita è che le cariche virali da PCR positive durante le prime settimane post-epidemia sono molto più elevate (la maggior parte delle volte Ct tra 20-25) rispetto per esempio agli emosieri. Possiamo usare l'evoluzione del Ct delle settimane post-epidemia per prevedere che ci stiamo avvicinando alla stabilità alla nascita quando il valore del Ct tende ad aumentare verso la negatività (Ct=>40). Poiché questa tecnica fornisce un intervallo Ct più ampio rispetto ad altri campioni, migliora la nostra capacità di valutare la tendenza a raggiungere la stabilità dell'allevamento. Al fine di fare un uso efficiente delle risorse, la raccomandazione standard è di non campionare le lingue nelle prime 10 settimane dopo l'epidemia poiché molto probabilmente saranno ancora altamente positive con Cts molto bassi.

Ad esempio, in questo primo grafico possiamo vedere che dalla 20a settimana dopo l'episodio di PRRS, la carica virale di ogni sacca di lingue di nati morti diminuisce perché il valore Ct dei risultati positivi della PCR aumenta così come la frequenza dei risultati negativi della PCR fino a raggiungere una consecutiva risultati PCR negativi (valori Ct=>40) (Figura 1)

Figura 1. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive all'episodio di PRRS.
Figura 1. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive all'episodio di PRRS.

In questo secondo esempio (Figura 2), dopo 30 settimane dall'epidemia, non è ancora comparsa alcuna settimana con esito PCR PRRS negativo e il valore Ct rimane basso e costante, indicando un possibile ricircolo continuo nella fase di gestazione. Possiamo concludere che le misure di controllo non sono state sufficienti e dovrebbero essere prese altre misure aggiuntive.

Figura 2. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive al focolaio di PRRS.
Figura 2. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive al focolaio di PRRS.

In questa situazione, raccomandiamo di raccogliere separatamente le lingue dei nati morti dai primi parti e dal resto dei cicli per valutare se la causa della continua instabilità sia l'infezione delle scrofe gravide durante il primo ciclo, in cui rileveremmo più campioni positivi e una maggiore carica virale nelle lingue provenienti di primi parti.

Figura 3. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive al 'episodo di PRRS di campioni di lingua di NM da scrofette e pluripare.
Figura 3. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive al 'episodo di PRRS di campioni di lingua di NM da scrofette e pluripare.

Infine, nel 3° allevamento (Figura 4), l'evoluzione è divisa in due fasi. Tra la settimana 26 e la 38 sembrava che l'allevamento si stesse avvicinando alla stabilità a causa della maggiore frequenza di risultati negativi della PCR e della bassa carica virale nei risultati positivi. Intorno alla settimana 40 c'è un marcato aumento della carica virale in tutti i campioni successivi. Il sequenziamento di questi campioni positivi ha determinato l'introduzione di un nuovo ceppo nell'allevamento e la probabile causa dell'aumento della carica virale nei successivi risultati dei campioni settimanali.

Figura 4. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive al focolaio di PRRS
Figura 4. Evoluzione dei valori PCR Ct nelle settimane successive al focolaio di PRRS

Possiamo concludere che il monitoraggio con la lingua dei nati morti è una tecnica non invasiva, facile e poco costosa che, eseguita di routine, ci consente di prevedere dopo diverse settimane di campionamento se ci stiamo avvicinando alla stabilità alla nascita.

Consultare la "Guida alle Malattie" per ulteriori informazioni

PRRSLa sindrome riproduttiva e respiratoria dei suini (PRRS) è l'infezione che più ha impatto sull'economia suinicola negli USA ed in altri paesi europei. Come il suo nome indica, il virus determina problemi riproduttivi e respiratori.

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